流动相跑空对色谱柱会产生显著的影响,以下是对这些影响的详细分析以及相应的处理措施:
### 一、对色谱柱的影响
1. **气泡进入色谱柱**
* 当流动相跑空时,泵会吸入空气,这些气泡可能会进入色谱柱。气泡的存在会干扰流动相的流动,导致流速不稳定,进而影响色谱分析的准确性和重复性。
2. **溶剂突然减少或中断**
* 流动相跑空意味着色谱柱内的溶剂突然减少或中断,这会导致样品在柱内的传质过程受到影响。具体来说,样品可能会在柱内滞留时间过长,造成峰形展宽和分辨率降低。此外,样品与固定相的相互作用也会减弱,导致保留时间缩短和灵敏度下降。
3. **柱子内部可能干涸**
* 在极端情况下,如果流动相长时间跑空,色谱柱内部可能会干涸。这会导致柱效显著降低,甚至可能损坏色谱柱。
4. **对泵和密封垫的损坏**
* 流动相还充当了活塞和密封垫之间的润滑剂,没有了流动相的润滑作用,密封垫很容易磨损。长时间在缺少流动相的情况下运行泵,还可能导致泵内部的密封圈损坏,进而影响泵的性能和寿命。
5. **系统压力异常**
* 流动相跑空后,系统内的压力可能会发生异常变化。这可能会导致单向阀、泵、柱子和检测器等部件堵塞或损坏。
### 二、处理措施
1. **立即停泵并断开管路**
* 发现流动相跑空后,首先要立即停止泵的运行,以防止进一步的损坏。同时,将流动相到脱气机等设备的管路断开,防止空气继续进入系统。
2. **排气和清洗**
* 使用注射器或其他工具,将泵及管路中的空气排出??梢源蚩逑捶В越洗蟮牧魉伲ㄈ?-5ml/min)进行排气,确保系统内的气泡被完全清除。然后换上足量的新流动相,通过泵进行循环清洗,以去除可能残留的杂质和气泡。
3. **检查并更换密封圈**
* 长时间的干磨可能导致泵内部的密封圈磨损。因此,需要检查密封圈的状况,如果发现磨损严重,应及时更换。为了确认密封圈的性能,可以进行压力和泄露测试。
4. **冲洗色谱柱**
* 使用适当的溶剂以较低的流速冲洗色谱柱,直至基线稳定且确认柱子内无气泡为止。这一步骤有助于恢复色谱柱的性能并去除可能残留的空气。
5. **设置?;げ问?*
* 在仪器软件中设置泵运行的最低压力值。当流动相不足导致压力下降时,泵将自动停止工作,以?;ひ瞧鞑皇芩鸹?。同时,设置溶剂瓶里流动相的实际体积以及最小允许运行的体积。软件可以根据流速和时间自动计算溶剂瓶内的剩余流动相量,并在到达最小允许运行的体积时自动停止运行。
6. **重新进样实验**
* 在完成上述步骤并确认仪器恢复正常后,可以进行重新进样实验。通过比较实验数据的前后变化,评估流动相跑空对实验结果的影响程度。
7. **预防措施**
* 定期对仪器设备进行检查和维护,确保各部件的正常运行和性能稳定。同时,严格遵守操作规程,避免操作失误导致的流动相跑空等问题的发生。
综上所述,流动相跑空对色谱柱的影响是显著的,但只要采取正确的处理措施和预防措施,就可以有效地减少或避免这些影响。 |
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