标准曲线在分析检测中扮演着至关重要的角色,以下是关于标准曲线的基础理论知识:
一、标准曲线的定义 分析检测中的标准曲线是指一系列已知含量(浓度/量)的物质与仪器响应/信号之间的关系。数学上,这种关系可以通过曲线方程来表示;图形上,则呈现为标准曲线。标准曲线的目的是可以根据标准曲线查出待测物质的含量。
二、标准曲线的制作要求 按GB/T 22554-2010《基于标准样品的线性校准》推荐,制作标准曲线时,应遵循以下要求:
浓度范围:标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围。 组分一致性:标准样品的组分应尽量与被测样品组分一致,以减少基体干扰。 浓度分布:标准样品的浓度值应等距离的分布在被测量范围内,以确保曲线的准确性和可靠性。 标准样品个数:标准样品的个数至少应有3个浓度,通常建议更多,以提高拟合的准确性和可靠性。 重复性:每个标准点至少重复2次,这个重复是指从稀释开始,以确保数据的稳定性和重复性。 三、标准曲线的核心问题 标准物质或标准品:需要找到确切浓度的标准物质或标准品。 基体匹配:标准系列和待测物质一定要有相同和一致的基体,以减少样品基体对仪器响应的干扰。 四、标准曲线的检验 标准曲线的检验是实际操作中的难点,主要包括以下方面:
精密度检验:考察试验点在拟合直线方程左右的分布情况,需用F检验,P<0.05作为线性检验合格的标准。 截距检验和斜率检验:分别考察Y=a+bX中a和b与0的统计学差异。a与0有差别说明有试剂空白或系统误差,而b若与0无差别说明仪器的灵敏度达不到分析要求。 决定系数:是相关系数的平方,提示回归方程所解释X对Y变化占Y变量的比值。 失拟检验:看曲线拟合后剩下残差与实验数据本身随机误差(变异)之间的差别,同样采用F检验,此时失拟检验P应>0.05。 残差的正态性检验:正态性才符合随机误差的特性。 综上所述,标准曲线的检验应该是线性检验结合失拟检验,以及残差的正态性检验结合,才是统计学上比较完备的。
五、标准曲线使用中的问题 是否需要人为增加(0,0)点:通常不能人为增加(0,0)点,因为0管进入仪器可能也有响应值,这也是考察试剂空白的一个重要步骤。 是否需要减掉试剂空白:不需要。仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做,但在构建标准曲线时,已经认为该响应值就是0浓度,即已经扣除了空白。 含量计算方法:在使用标准曲线查含量时,可以先用样品信号减空白信号,然后去标准曲线推算含量。这样出来的含量不确定度要小一些。 总之,标准曲线是分析检测中的重要工具,其制作、检验和使用都需要严格遵守相关要求和规范,以确保结果的准确性和可靠性。 |
- 上一篇:基于分析物化学性质定制方法
- 下一篇:分析方法学验证中的检测限和定量限